春节假期将至,在实验室忙碌了一年的小伙伴们将要迎来悠长假期。小编提醒小伙伴们休假前要做好仪器关机工作,实验室用电、用水安全要检查。
一、液质联用仪
(一)LC-MS/MS关机篇
1、冲洗液相系统置换溶液
取下完成冲洗的色谱柱,用堵头密封保存;换上两通,将流动相置换成50%的甲醇水溶液,0.4 mL/min流速冲洗60分钟;流动相和洗针液置换成100%甲醇,流动相管路排气5分钟,自动进样器管路排气25分钟,0.4 mL/min流速冲洗管路20 分钟。
2、液质系统待机、卸真空
关闭液相,质谱待机;
打开软件“系统控制(System Control)”模块,点击“自动关机(Auto Shutdown)”,待质谱加热模块和DL降温后,分子涡轮泵和机械泵停止,等待关机完成后,即可关闭软件,使用DL Plug堵住DL入口。
3、关机
关闭液相色谱各单元和质谱单元电源;
关闭氮气发生器电源或液氮罐总气阀,关闭氩气钢瓶总气阀;
清空废液,检查废气管位置。
(二)LC-MS/MS开机篇
1、接通硬件电源
依次打开液相色谱各单元、质谱主机和电脑的电源开关,可观察到液相各单元的绿色指示灯依次亮起,质谱主机的“STATUS”指示灯亮起。
2、开启氮气和氩气
step1:打开氩气钢瓶总气阀、开启氮气发生器或液氮罐总气阀。检查氮气和氩气钢瓶的气体输出压力(氮气减压阀表头压力读数在690-800 kPa,氩气减压阀表头压力读数在500 kPa)。
step2:启动LabSolutions,点击窗口的左侧助手栏中“主菜单(Main)”按钮,然后点击窗口左侧最下方“系统控制(System Control)”的按钮,点击“Advanced”按钮,将CID GAS 右侧的“Open”按钮按下,以便打开碰撞气。
3、启动真空
在“系统控制(System Control)”模块中点击“自动开机(Auto Startup)”,机械泵和分子涡轮泵启动,等待真空稳定(建议等待12小时以上)。
4、系统冲洗和方法平衡
step1:将输送水相的流动相管路置换成超纯水,洗针液管路置换成50%甲醇水溶液,柱塞杆清洗管路置换成10%异丙醇水溶液。流动相管路排气5分钟,自动进样器管路排气25分钟。
step2:采用0.4 mL/min流速、50%甲醇,冲洗色谱系统60分钟。
step3:拔出DL管堵头。
step4:按照需要进行的实验条件配制流动相,将配制好的流动相放在仪器上,执行流动相管路排气操作后,确认色谱柱在柱温箱内正确安装,调用方法文件,启动液相色谱和质谱单元,进行方法平衡。
二、液相色谱仪
(一)LC关机篇
1、色谱柱冲洗和保存
停机前,将色谱柱彻底冲洗,使用说明书中指明的溶剂保存色谱柱;
从仪器上卸下色谱柱,用堵头密封保存
2、仪器冲洗和溶剂置换
液相色谱相关单元需全部进行溶液置换和冲洗,防止管路污染或堵塞。
反相色谱置换步骤
step1:取下色谱柱后用两通连接管路。
step2:如果流动相中含有缓冲盐,将相应管路更换为纯水,排气(Purge)5分钟,再以1.0 mL/min流速冲洗色谱系统30分钟。
step3:将仪器所有管路都置换成100%纯甲醇溶液(包括流动相管路比如四元低压梯度系统A/B/C/D四管路或者二元高压梯度系统A/B两管路、进样器洗针液管路、泵柱塞杆清洗液管路)。
step4:将流动相排气(Purge)5分钟,自动进样器排气25分钟,以1.0 mL/min流速冲洗色谱系统30分钟。
(注意:如果流动相中不含缓冲盐,可跳过step2)
正相色谱置换步骤
step1:取下色谱柱用两通连接管路。
step2:将仪器所有管路都置换成纯异丙醇(包括流动相管路比如四元低压梯度系统A/B/C/D四管路或者二元高压梯度系统A/B两管路、进样器洗针液管路。
step3:将流动相排气(Purge) 5分钟,自动进样器排气25分钟,以1.0 mL/min流速冲洗色谱系统30分钟。
3、关机
step1:清理进样器中的样品瓶,妥善处理
step2:清空废液瓶中的废液。
step3:关闭所有单元的电源。
(二)LC开机篇
1、接通硬件电源
依次打开液相色谱各单元和电脑的电源开关,观察液相各单元的指示灯依次亮起。
2、仪器溶剂置换
反相色谱置换步骤
step1:将输送水相的流动相管路置换成超纯水,自动进样器洗针液管路置换成50%甲醇水溶液,柱塞杆清洗管路置换成10%异丙醇水溶液。流动相管路排气(purge) 5分钟,自动进样器管路排气(purge) 25分钟。