而据第三军医大学医学分析测试中心万瑛教授介绍,多色流式(Multi-color Flow Cytometry)指同时使用多种(四色以上)颜色荧光标记的流式检测与分析,该技术是随着新荧光分子的不断问世和流式细胞仪分析参数的增加而出现的,是目前实现多参数细胞表型检测的主要手段。
不过,传统的流式技术主要基于对荧光发射光谱的检测,但荧光基团发射光谱一般比较宽,其间往往会发生重叠。不仅限制了检测通道的数量(<20个),还会带来严重的串色问题,很多通道的信号需要复杂的补偿计算。
为了解决这些问题,最新的质谱流式细胞术(CyTOF)应运而生。据万瑛介绍,传统的流式技术主要使用各种荧光基团作为抗体的标签,使用激光器和光电倍增管作为检测手段,而CyTOF用金属元素偶联抗体作为标记手段,以ICP质谱为检测手段,通过这些改进,质谱流式技术巧妙的实现了更多参数的检测。总体来说,CyTOF具有很多优势:通道多,通道数>110个,检测范围88-210Da;无漏光,通道间相互影响小于0.3%,无需计算补偿;背景低,标记元素在细胞内含量极低(<1原子/细胞)等。不过,目前国内的CyTOF产品还比较少。